toxreviewТоксикологический вестникToxicological Review0869-79223034-4611Federal Scientific Center of Hygiene named after F.F. Erisman10.47470/0869-7922-2023-31-5-313-328cszgnptoxreview-760Research ArticleЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ТОКСИКОЛОГИЯECOLOGICAL TOXICOLOGYОценка токсического воздействия ионов меди на показатели состояния бентосной диатомовой водоросли Actinocyclus subtilis (W.Gregory) Ralfs 1861 в экспериментеEvaluation the toxic effect of copper ions on the condition indices of benthic diatom Actinocyclus subtilis (W.Gregory) Ralfs 1861 in the experimenthttps://orcid.org/0000-0002-0137-486XПетровАлексей НиколаевичPetrovAlexey N.

Кандидат биол. наук, вед. науч. сотр., зав. отделом Экологии бентоса ФГБУН «ФИЦ "Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН"», 299011, Севастополь, Российская Федерация.

e-mail: alexpet-14@mail.ru

https://www.scopus.com/authid/detail.uri?authorId=8973404400

Leading researcher, Head of Benthos Ecology Dept., FRC “A.O. Kovalevsky Institute of Biology of the Southern Seas of RAS”, Sevastopol 335011, Russia.

e-mail: alexpet-14@mail.ru

https://www.scopus.com/authid/detail.uri?authorId=8973404400

alexpet-14@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9963-4967НевроваЕлена Л.NevrovaElena L.

Доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела экологии бентоса ФГБУН «ФИЦ "Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН"», 299011, Севастополь, Российская Федерация.

e-mail: el_nevrova@mail.ru

https://www.scopus.com/authid/detail.uri?authorId=35277386100

https://www.scopus.com/authid/detail.uri?authorId=35277386100

el_nevrova@mail.ruФГБУН «Федеральный исследовательский центр "Институт биологии южных морей имени А.О. Ковалевского РАН"РоссияA.O. Kovalevsky Institute of Biology of the Southern Seas RASRussian Federation202313112023315313328Copyright © Петров А.Н., Неврова Е.Л., 20232023Петров А.Н., Неврова Е.Л.Petrov A.N., Nevrova E.L.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.toxreview.ru/jour/article/view/760Введение

Введение. Загрязнение морских прибрежных акваторий обусловливает актуальность экомониторинга на основе биотестирования с использованием микроводорослей с различной видоспецифической устойчивостью к действию поллютантов, что расширяет их применение в качестве биоиндикаторов.

Цель работы — определение пороговой концентрации ионов меди (Cu2+) для выживания и прироста численности клеток бентосной диатомовой водоросли Actinocyclus subtilis Ralfs 1861 под воздействием широкого диапазона концентрации токсиканта в ходе 10-суточных экспериментов.

Материал и методы

Материал и методы. Изучена реакция клоновой культуры A. subtilis на воздействие возрастающих концентраций сульфата меди (от 16 до 1024 мкг/л в пересчёте на ионы Cu2+). В соответствии с разработанным протоколом, оценены следующие показатели: абсолютная численность и доля (%) живых клеток в тест-культуре, а также удельный прирост численности клеток при разных концентрациях токсиканта. Подсчет живых и мертвых клеток проведен по микрофотографиям для 12–15 случайных полей зрения под световым микроскопом Nikon Eclipse.

Результаты

Результаты. В контроле и при концентрации ионов меди 16 мкг/л прирост численности клеток в культуре описывается сигмоидной кривой отклика. В контроле фаза экспоненциального роста приходится на 5–7-е сутки, а при концентрации 16 мкг/л — на 3–5-е сутки. Определена пороговая концентрация ионов меди (32 мкг/л) для выживания A. subtilis, что в 3–7 раз ниже, чем для других видов бентосных диатомовых. При концентрации 32 мкг/л на кривой численности отсутствуют фазы ускорения и экспоненциального роста, а доля живых клеток снижается до 80% от контроля уже на 3-и сутки и до 39% — к 10-м суткам. При концентрациях Cu2+ 64 мкг/л и выше наблюдается угнетение и гибель культуры уже в 1–3-и сутки. В период 1–5-х суток отмечен положительный удельный прирост культуры A. subtilis при концентрации 16 и 32 мкг/л, при концентрации 64 мкг/л и выше наблюдается отмирание культуры. Для периода 5–10-х суток получены отрицательные значения удельного прироста культуры при всех концентрациях токсиканта.

Ограничения исследования

Ограничения исследования. По результатам 10-суточных экспериментов с культурой морской бентосной диатомовой A. subtilis изучено влияние 8 концентраций сульфата меди. Для каждой концентрации учитывалось по 3 повторности, всего выполнено более 1350 измерений, что представляет достаточную выборку для статистически надежного определения видоспецифичных пороговых значений токсичности ионов меди.

Заключение

Заключение. Полученные результаты позволяют рекомендовать A. subtilis в качестве нового высокочувствительного объекта для токсикологических экспериментов, а также при экологическом мониторинге акваторий, подверженных техногенному загрязнению.

Соблюдение этических стандартов. Исследование не требует представления заключения комитета по биомедицинской этике или иных документов, так как все эксперименты проводились на массовых одноклеточных нетоксичных водорослях, что не нарушает запреты, связанные с ущербом для экологической среды, жизненного пространства биологических сообществ, а также не приводит к необратимым изменениям в биологической (генетической) природе и здоровье человека.

Участие авторов

Участие авторов. Все соавторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям ICMJE (все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией).

Благодарность

Благодарность. Авторы выражают благодарность С.А. Трофимову и Ю.И. Литвину за помощь при содержании клоновых культур и проведение экспериментов, а также В.Н. Лишаеву за микрофотографирование на СЭМ Hitachi SU3500.

Конфликт интересов

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Финансирование

Финансирование. Работа проведена в отделе Экологии бентоса ФГБУН «ФИЦ "Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН"» в рамках Государственного задания по теме № 121030100028-02.

Поступила в редакцию

Поступила в редакцию: 09 июня 2023 / Принята к печати: 19 октября 2023 / Опубликована: 30 октября 202

Introduction

Introduction. Pollution of marine coastal areas lead to the relevance of environmental monitoring including application of biotesting methods based on- the cultures of unicellular algae. Microalgae have different species-specific resistance to pollutants that expands application of different species as bioindicators of marine pollution.

The aim of the study was to determine the threshold concentration of copper ions (Cu2+) for the survival and increase in the cells number of benthic diatom Actinocyclus subtilis (W.Gregory) Ralfs 1861 (Bacillariophyta) under the wide range of toxicant concentrations during 10-day toxicological experiments.

Material and methods

Material and methods. The response of strain culture of the benthic diatom A. subtilis to various concentrations of copper sulfate (ranged from 16 to 1024 μg/l in terms of Cu2+ ions) was studied. In accordance with the previously developed protocol, the following indices were evaluated: alterations in the absolute number and proportion (%) of alive cells in the test-culture, as well as the specific growth rate in the number of A. subtilis cells at different concentrations of toxicant. Counting of alive and dead cells was carried out by micrographs taken for 12–15 random viewing fields under Nikon Eclipse inverted light microscope.

Results

Results. It was found that in the control and at concentration of copper ions 16 μg/l, the increase in the absolute number of cells in culture is described by sigmoid response curve. At the control еhe exponential growth phase occurs on days 5–7 and at concentration of 16 µg/l on days 3–5 of the experiment. The threshold concentration of copper ions (32 μg/l) which is critical for the survival of A. subtilis was determined, which is 3–7 times lower than threshold level for other benthic diatom species. At concentration of 32 µg/l, the phases of acceleration and exponential growth on the abundance curve are absent. The proportion of living cells in the culture decreases to 80% of the control level on day 3 and to 39% by day 10. At Cu2+ concentrations of 64 µg/l and above, sharp inhibition and death of culture is observed as early as 1–3 days. A positive specific growth rate of A. subtilis culture was revealed in the period of 1–5 days at copper concentration of 16 and 32 µg/l, and at concentration of 64 µg/l and higher the culture dies off. Negative values of the specific growth rate for all concentrations of the toxicant within the period of 5–10 days were obtained.

Limitations

Limitations. By the results of 10-day experiments the effect of 8 concentrations of copper sulfate on the culture of marine benthic diatom A. subtilis was studied. Three replicates in each concentration and exposure time were measured (1350 measurements in total), which is sufficient sampling for statistically reliable determination of the threshold values of copper ion toxicity for given test object.

Conclusion

Conclusion. Considering the results obtained, the benthic diatom A. subtilis is highly sensitive to copper ions impact and can be recommended as new test-object for toxicology, as well as for application in monitoring of marine water areas subject to technogenic pollution.

Compliance with ethical standards. The study does not require the decision of biomedical ethics committee or other documents, since all experiments were carried out on common unicellular non-toxic algae, which does not violate any prohibitions associated with damage to the ecological environment, the living space of bio-communities, and also does not lead to irreversible changes in the biological (genetic) nature and human health.

Contribution of the authors. All authors confirm that their authorship complies with the international ICMJE criteria (all authors made a significant contribution to the development of concept, research and preparation of the article, read and approved its final version before publication).

Gratitude

Gratitude. The authors express their gratitude to S.A. Trofimov and Yu.I. Litvin for their help in maintaining clone cultures and conducting experiments, as well as to V.N. Lishaev for microphotography on the Hitachi SU3500 SEM.

Conflict of interests

Conflict of interests. The authors declare no conflict of interests.

Acknowledgements

Acknowledgements. This study was carried out as a part of the State Assignment No. 121030100028-02 of the A.O. Kovalevsky Institute of Biology of the Southern Seas of RAS in Benthos Ecology Dept.

Received

Received: June 9, 2023 / Accepted: October 19, 2023 / Published: October 30, 2023

 

 

биотестированиемикроводоросликлоновая культурасульфат медипороговая концентрациячисленность клетокЧёрное мореbiotestingmicroalgaeclonal straincopperthreshold concentrationcell numberBlack SeaReferencesКапков В.И. Водоросли как биомаркеры загрязнения тяжелыми металлами морских прибрежных экосистем: Автореф. дис. … д-ра биол. наук. М.; 2003.Kapkov V.I. Algae as biomarkers of marine coastal ecosystem pollution by heavy metals: Diss. Moscow; 2003. (in Russian)Капков В.И., Шошина Е.В., Беленикина О.А. Использование морских одноклеточных водорослей в биологическом мониторинге. Вестник МГТУ. 2017; 20(2): 308–15. https://doi.org/10.21443/1560-9278-2017-20-2-308-315Kapkov V.I., Shoshina E.V., Belenikina O.A. Using the marine unicellular algae in biological minitoring. Vestnik MGTU. 2017; 20(2): 308–315. https://doi.org/10.21443/1560-9278-2017-20-2-308-315 (in Russian)Boyle T.P. The effect of environmental contaminations on aquatic algae. In: Algae as ecological indicators. Shubert L.T. (Ed.). London: Academic Press, 1984: 237–56.Boyle T.P. The effect of environmental contaminations on aquatic algae. In: Algae as ecological indicators. Shubert L.T. (Ed.). London: Academic Press, 1984: 237–56.Ahalya N., Ramachandra T.V., Kanamadi N. Biosorption of heavy metals. Research Journal of Chemical & Environmental Sciences. 2003; 7(4): 71–9.Ahalya N., Ramachandra T.V., Kanamadi N. Biosorption of heavy metals. Research Journal of Chemical & Environmental Sciences. 2003; 7(4): 71–9.Капков В.И., Беленикина О.А. Исследование устойчивости массовых видов морских водорослей к тяжёлым металлам. Вестник Московского университета. Сер. 16. Биология. 2007; 1: 35–8.Kapkov V.I., Belenikina O.A. Research of stability of mass species of marine algae to heavy metals. Vestnik Moskovskogo universiteta. Ser. 16. Biologiya. 2007; 1: 35–8. (in Russian)Miazek K., Iwanek W., Remacle C., Richel A., Goffin D. Effect of metals, metalloids and metallic nanoparticles on microalgae growth and industrial products biosynthesis: A review. International Journal of Molecular Sciences. 2015; 16(10): 23929–69. https://doi.org/10.3390/ijms161023929Miazek K., Iwanek W., Remacle C., Richel A., Goffin D. Effect of metals, metalloids and metallic nanoparticles on microalgae growth and industrial products biosynthesis: A review. International Journal of Molecular Sciences. 2015; 16(10): 23929–69. https://doi.org/10.3390/ijms161023929Ali H., Khan E., Ilahi I. Environmental chemistry and ecotoxicology of hazardous heavy metals: environmental persistence, toxicity, and bioaccumulation. Journal of Chemistry. 2019; 19: 6730305. https://doi.org/10.1155/2019/6730305Ali H., Khan E., Ilahi I. Environmental chemistry and ecotoxicology of hazardous heavy metals: environmental persistence, toxicity, and bioaccumulation. Journal of Chemistry. 2019; 19: 6730305. https://doi.org/10.1155/2019/6730305Маркина Ж.В., Айздайчер Н.А. Влияние меди на численность, морфологию клеток и содержание фотосинтетических пигментов микроводоросли. Porphyridium purpureum. Морской биологический журнал. 2019; 4(4): 34–40. https://doi.org/10.21072/mbj.2019.04.4.03Markina Zh.V., Aizdaicher N.A. 2019. The effect of copper on the abundance, cell morphology and content of photosynthetic pigments in the microalga. Porphyridium purpureum. Marine Biological Journal. 2019; 4(4): 34–40. https://doi.org/10.21072/mbj.2019.04.4.03 (in Russian)Crespo E., Losano P., Blasco J., Moreno-Garrido I. Effect of copper, irgarol and atrazine on epiphytes attached to artificial devices for coastal ecotoxicology bioassays. Bull of Environmental Contamination & Toxicology. 2013; 91(6): 656–700. https://doi.org/10.1007/s00128-013-1122-4Crespo E., Losano P., Blasco J., Moreno-Garrido I. Effect of copper, irgarol and atrazine on epiphytes attached to artificial devices for coastal ecotoxicology bioassays. Bull of Environmental Contamination & Toxicology. 2013; 91(6): 656–700. https://doi.org/10.1007/s00128-013-1122-4Неврова Е.Л., Снигирева А.А., Петров А.Н., Ковалева Г.В. Руководство по изучению морского микрофитобентоса и его применению для контроля качества среды. Симферополь: Н.Орiанда; 2015. https://www.researchgate.net/publication/291148289Nevrova E.L., Snigireva A.A., Petrov A.N., Kovaleva G.V. Guidelines for quality control of the Black Sea. Microphytobenthos. Simferopol: Orianda Publ.; 2015. https://www.researchgate.net/publication/291148289Овсяный Е.И., Романов А.С., Игнатьева О.Г. Распределение тяжёлых металлов в поверхностном слое донных осадков Севастопольской бухты (Чёрное море). Морской экологический журнал. 2003; 2(2): 85–101.Ovsyaniy E.I., Romanov A.S., Ignatieva O.G. Distribution of heavy metals in superficial layer of bottom sediments of Sevastopol bay (the Black Sea). Morskoj ekologicheskij zhurnal. 2003; 2(2): 85–93. https://repository.marine-research.org/handle/299011/710 (in Russian)Петров А.Н., Неврова Е.Л. Сравнительный анализ структуры таксоцена донных диатомовых (Bacillariophyta) в районах с различным уровнем техногенного загрязнения (Чёрное море, Крым). Морской экологический журнал. 2004; 3(2): 72–83.Petrov A.N., Nevrova E.L. Comparative analysis of taxocene structures of benthic diatoms (Bacillariophyta) in regions with different level of technogenic pollution (the Black Sea, Crimea). Morskoj ekologicheskij zhurnal. 2004; 3(2): 72–83. https://repository.marine-research.org/handle/299011/748 (in Russian)Burgess R.M., Ho K.T., Terletskaya A.V., Milyukin M.V., Demchenko V.Y., Petrov A.N., Bogoslavskaya T.A. и др. Concentration and distribution of hydrophobic organic contaminants and metals in the estuaries of Ukraine. Maine Pollution Bulletin. 2009; 58 (8): 1103–15. https://doi.org/ 10.1016/j.marpolbul.2009.04.013Burgess R.M., Ho K.T., Terletskaya A.V., Milyukin M.V., Demchenko V.Y., Petrov A.N., Bogoslavskaya T.A. и др. Concentration and distribution of hydrophobic organic contaminants and metals in the estuaries of Ukraine. Maine Pollution Bulletin. 2009; 58 (8): 1103–15. https://doi.org/ 10.1016/j.marpolbul.2009.04.013Levy J., Stauber J.L., Jolley D.F. Sensitivity of marine macroalgae to copper: the effect of biotic factors on copper absorption and toxicity. Science of the total environments. 2007; 387 (1–3): 141–54. https://doi.org/10.1016/j.scototenv.2007.07.016Levy J., Stauber J.L., Jolley D.F. Sensitivity of marine macroalgae to copper: the effect of biotic factors on copper absorption and toxicity. Science of the total environments. 2007; 387 (1–3): 141–54. https://doi.org/10.1016/j.scototenv.2007.07.016Liu G., Chai X., Shao Y., Hu L., Xie Q., Wu H. Toxicity of copper, lead, and cadmium on the motility of two marine microalgae Isochrysis galbana and Tetraselmis chui. J Environ Sci. 2011; 23(2): 330–5. https://doi.org/10.1016/S1001-0742(10)60410-XLiu G., Chai X., Shao Y., Hu L., Xie Q., Wu H. Toxicity of copper, lead, and cadmium on the motility of two marine microalgae Isochrysis galbana and Tetraselmis chui. J Environ Sci. 2011; 23(2): 330–5. https://doi.org/10.1016/S1001-0742(10)60410-XГелашвили Д.Б., ред. Принципы и методы экологической токсикологии. Нижний Новгород: Изд-во ННГУ; 2016.Gelashvili D.B. Principles and methods of environmental toxicology [Principy` i metody` e`kologicheskoj toksikologii]. Nizhniy Novgorod: Nizhegorodskiy gosuniversitet, 2016. (In Russian)Leung P.T.Y., Yi A.X., Ip J.C.H., Mak S.S.T., Leung K.M.Y. Photosynthetic and transcriptional responses of the marine diatom Thalassiosira pseudonana to the combined effect of temperature stress and copper exposure. Mar. Pol. Bull. 2017; 124(2): 938–45. https//doi.org/10.1016/j.marpolbul.2017.03.038Leung P.T.Y., Yi A.X., Ip J.C.H., Mak S.S.T., Leung K.M.Y. Photosynthetic and transcriptional responses of the marine diatom Thalassiosira pseudonana to the combined effect of temperature stress and copper exposure. Mar. Pol. Bull. 2017; 124(2): 938–45. https//doi.org/10.1016/j.marpolbul.2017.03.038Ипатова В.И., Дмитриева А.Г., Филенко О.Ф., Дрозденко Т.В. О некоторых особенностях физиологической гетерогенности популяции Scenedesmus quadricauda (Turp.) Breb. в присутствии низких концентраций металлов. Токсикологический вестник. 2018; 149(2): 34–43.Ipatova V.I., Dmitrieva A.G., Filenko О.F., Drozdenko T.V. About some peculiarities of the physiological heterogeneity of the population of Scenedesmus quadricauda (Turp.) Breb. in the presence of low concentrations of metals. Toksikologicheskiy vestnik. 2018, 149(2): 34–43. https://doi.org/10.36946/0869-7922-2018-2-34-43 (in Russian)Maltsev Y.I., Maltseva S.Y., Kulikovskiy M.S. Toxic effect of copper on soil microalgae: experimental data and critical review. International Journal of Environmental Science and Technology. 2023. https://doi.org/10.1007/s13762-023-04766-3Maltsev Y.I., Maltseva S.Y., Kulikovskiy M.S. Toxic effect of copper on soil microalgae: experimental data and critical review. International Journal of Environmental Science and Technology. 2023. https://doi.org/10.1007/s13762-023-04766-3Stauber J.L., Florence T.M. Mechanism of toxicity of ionic copper and copper complexes to algae. Marine Biology. 1987; 94(4): 511–9.Stauber J.L., Florence T.M. Mechanism of toxicity of ionic copper and copper complexes to algae. Marine Biology. 1987; 94(4): 511–9.Horvatić J., Peršić V. The effect of Ni2+, Co2+, Zn2+, Cd2+ and Hg2+ on the growth rate of marine diatom Phaeodactylum tricornutum Bohlin: microplate growth inhibition test. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 2007; 79: 494–8. https://doi.org/10.1007/S00128-007-9291-7Horvatić J., Peršić V. The effect of Ni2+, Co2+, Zn2+, Cd2+ and Hg2+ on the growth rate of marine diatom Phaeodactylum tricornutum Bohlin: microplate growth inhibition test. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 2007; 79: 494–8. https://doi.org/10.1007/S00128-007-9291-7Cid A., Herrero C., Torres E., Abalde J. Copper toxicity on the marine microalga Phaeodactylum tricornutum: effects on photosynthesis and related parameters. Aquatic toxicology. 1995; 31(2): 165–74.Cid A., Herrero C., Torres E., Abalde J. Copper toxicity on the marine microalga Phaeodactylum tricornutum: effects on photosynthesis and related parameters. Aquatic toxicology. 1995; 31(2): 165–74.Маркина Ж.В., Айздайчер Н.А. Оценка качества вод Амурского залива Японского моря на основе биотестирования с применением одноклеточной водоросли Pheodactylum tricornutum Bohlin. Сибирский экологический журнал. 2011; 1: 99–105.Markina Zh.V., Ayzdaycher N.A. Evaluation of water quality of Amur Bay of the Sea of Japan based on biotesting using the unicellular alga Pheodactylum tricornutum Bohlin. Sibirskiy ekologicheskiy zhurnal. 2011; 1: 99–105. (In Russian)Филенко О.Ф., Марушкина Е.В., Дмитриева А.Г. Оценка воздействия меди на модельную популяцию водоросли Scenedesmus quadricauda (Turp.) Bréb. методом микрокультур. Гидробиологический журнал. 2007; 42(6): 53–61.Filenko O.F., Marushkina E.V., Dmitrieva A.G. Assessment of the copper effect on the model population of the Scenedesmus quadricauda (Turp.) Bréb. by microculture method. Gidrobiologicheskiy zhurnal. 2007; 42(6): 53–61. (In Russian)Романова Д.Ю., Петров А.Н., Неврова Е.Л. Действие сульфата меди на рост и морфологию клеток клоновых культур четырёх видов бентосных диатомовых водорослей (Bacillariophyta) Чёрного моря. Морской биологический журнал. 2017; 2(3): 53–67. https://doi.org/10.21072/mbj.2017.02.3.05Romanova D.Yu., Petrov A.N., Nevrova E.L. 2017. Copper sulphate impact on growth and cell morphology of clonal strains of four benthic diatom species (Bacillariophyta) from the Black Sea. Mar. Biol. Journal. 2017; 2(3): 53–67. https://doi.org/10.21072/mbj.2017.02.3.05 (in Russian)Nevrova E.L, Petrov A.N. Evaluation of the threshold tolerance of marine benthic diatom Pleurosigma aestuarii (Bréb. In Kkütz.) W. Smith 1853 (Bacillariophyta) under the copper (II) ions impact. Vodnye bioresursy i sreda obitaniya. 2023; 6(1): 73–81. https://doi.org/10.47921/2619-1024-2023-6-1-73Nevrova E.L, Petrov A.N. Evaluation of the threshold tolerance of marine benthic diatom Pleurosigma aestuarii (Bréb. In Kkütz.) W. Smith 1853 (Bacillariophyta) under the copper (II) ions impact. Vodnye bioresursy i sreda obitaniya. 2023; 6(1): 73–81. https://doi.org/10.47921/2619-1024-2023-6-1-73Andersen R.A., Berges J.A., Harrison P.J., Watanabe M.M. Recipes for freshwater and seawater media. In: Algal culturing techniques. Andersen R.A., еd. Elsevier Academic Press, 2005: 429–538.Andersen R.A., Berges J.A., Harrison P.J., Watanabe M.M. Recipes for freshwater and seawater media. In: Algal culturing techniques. Andersen R.A., еd. Elsevier Academic Press, 2005: 429–538.Петров А.Н., Неврова Е.Л. Оценка неоднородности распределения клеток при токсикологических экспериментах с клоновыми культурами бентосных диатомовых водорослей. Морской биологический журнал. 2020; 5(2): 76–87. https://doi.org/10.21072/mbj.2020.05.2.07Petrov A.N., Nevrova E.L. Estimation of cell distribution heterogeneity at toxicological experiments with clonal cultures of benthic diatoms. Morskoy Biologicheskiy Zhurnal = Marine Biological Journal. 2020; 5(2): 76–87. https://doi.org/10.21072/mbj.2020.05.2.07 (in Russian)Неврова Е.Л., Петров А.Н. Динамика роста бентосной диатомовой водоросли Ardissonea crystallina (C.Agardh) Grunow, 1880 (Bacillariophyta) при воздействии ионов меди. Морской биологический журнал. 2022; 7(4): 31–45. https://10.21072/mbj.2022.07.4.03 https://elibrary.ru/ngurdhNevrova E.L., Petrov A.N. Growth dynamics of the benthic diatom Ardissonea crystallina (C. Agardh) Grunow, 1880 (Bacillariophyta) under copper ions effect. Marine Biological Journal. 2022; 7(4): 31–45. https://10.21072/mbj.2022.07.4.03 https://elibrary.ru/ngurdh (in Russian)Петров А.Н., Неврова Е.Л. Экспериментальная оценка токсикорезистентности бентосной микроводоросли Thalassiosira excentrica Cleve 1903 (Bacillariophyta) при воздействии ионов меди. Вестник МГТУ. 2023; 26(1): 78–87. https://doi.org/10.21443/1560-9278-2023-26-1-78-87Petrov A.N., Nevrova E.L. Experimental evaluation of toxic resistance of benthic microalgae Thalassiosira excentrica Cleve 1903 (Bacillariophyta) under the copper ions impact. Vestnik MGTU. 2023; 26(1): 78–87. https://doi.org/10.21443/1560-9278-2023-26-1-78-87 (in Russian)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.