Введение. Существующие на данный момент антиагрегантные средства проявляют широкий спектр побочных эффектов, ограничивающих их применение. Актуальным является поиск и создание эффективного средства для коррекции повышенного тромбогенного потенциала и обладающего широким профилем лекарственной безопасности. В данной статье представлены результаты токсикологического исследования нового производного бензимидазола соединения РУ-891, проявляющего выраженные антиагрегантные свойства. Материал и методы. Для проведения исследований сформированы группы контрольных и опытных животных – нелинейных крыс обоего пола. Введение испытуемой ФС (фармацевтическая субстанция) на растворе дистиллированной воды в объеме 4 мл/кг проводилось внутрижелудочно, ежедневно в течение 6 мес. Исследуемую ФС РУ-891 вводили крысам в дозах: 23 мг/кг – 1-я опытная группа; 460 мг/кг – 2-я опытная группа. Контрольной группе животных внутрижелудочно вводили дистиллированную воду в дозе 4 мл/кг. Во время проведения эксперимента проводили еженедельные измерения массы тела, массу тела выражали в г, прирост в %. Исследовали поведенческую активность в классическом тесте «открытое поле» по окончанию 1-, 6- и 7-го месяцев хронического эксперимента. Исследование состояния сердечно-сосудистой системы проводили методом электрокардиографии, записанной у наркотизированных животных. Оценку выделительной функции печени и выводящей функции почек проводили с помощью нагрузочных тестов с красителями «бромсульфалеин» и «феноловый красный». Оценку влияния ФС РУ-891 на гематологические показатели периферической крови крыс проводили по показателям: общего количества эритроцитов, тромбоцитов, уровням гемоглобина, гематокрита, количества лейкоцитов. При оценке влияния на свертываемость крови использовали классический тест Мас-Магро. При морфологическом исследовании проводили макро- и микроскопическую оценку состояния органов и определяли коэффициенты масс органов. Гистологические микроскопические исследования проводили на микроскопе ЛЮМАН И2, используя окуляр 7 и объектив 40. Для проведения статистической обработки результатов использовали пакет прикладных программ Microsoft Excel и Statistica 6.0. Результаты. В экспериментах на половозрелых аутобредных крысах самцах и самках проведены доклинические исследования по оценке токсикологических свойств нового производного бензимидазола – соединения РУ-891 при 6-месячном внутрижелудочном введении в дозах 23 мг/кг (экспериментально доказанная терапевтическая доза (ТД)) и 460 мг/кг (превышающая ТД в 20 раз). Установлено, что под действием субстанции РУ-891 в дозе 23 мг/кг общее состояние животных, прирост массы тела, гематологические, биохимические, электрокардиографические показатели, как и функциональное состояние органов детоксикации и выведения соответствовали значениям контрольной группы. В исследованиях на животных, получавших субстанцию РУ-891 в дозе 460 мг/кг (20 ТД) отмечено постепенное ухудшение общего состояния (повышение массы тела, наиболее выражено у самцов крыс), активизация поведенческой активности у самок, но ее угнетение – у самцов, изменения, зависимые от пола животных, в периферической крови (повышение уровня эритроцитов и времени свертывания крови у крыс самцов и отсутствие влияния на данные параметры у самок), снижение выделительной функции печени, но активация экскреторной функции почек, патоморфологические негативные изменения в печени. В исследованиях, проведенных через один месяц после отмены введения соединения РУ-891 в дозе 460 мг/кг, интегральные показатели (прирост массы тела, общее состояние, поведенческая активность) животных, а также изменения, зафиксированные со стороны гематологических, функциональных и структурных патоморфологических нарушений в печени были практически нивелированы до значений контроля, что, вероятно, может свидетельствовать об отсутствии патологического токсического влияния исследуемой субстанции РУ-891 при 6-месячном пероральном введении крысам в дозе 460. При этом, учитывая результаты морфологических и функциональных исследований можно предположить наличие влияния соединения РУ-891 в дозе 460 мг/кг на печень, как на «орган-мишень». Однако данное повреждающее влияние исследуемого соединения на детоксикационную функцию печени было обратимым, поскольку практически нивелировалось до состояния контроля уже через месяц после отмены его введения животным. Ограничение исследования. при проведении исследования были использованы половозрелые нелинейные крысы обоего пола, количество особей в контрольных и экспериментальных группах было достаточным для получения статистически значимых результатов. Заключение. ФС RU-891 в дозе 23 мг/кг при 6-месячном введении крысам является не токсичной и безопасной, поскольку не вызывает необратимых изменений в общем состоянии, поведении, гематологических параметрах, биохимических показателях крови и мочи, функциональной активности сердца. При ежедневном введении ФС RU-891 в дозе 460 мг/кг выявлено патологическое воздействие на печень и почки, сохраняющееся в период отмены.
Introduction. Currently existing antiplatelet agents exhibit a wide range of side effects that limit their use. It is urgent to search for and create an effective agent for the correction of increased thrombogenic potential and having a wide profile of drug safety. This article presents the results of a toxicological study of a new benzimidazole derivative of the compound RU-891, which exhibits pronounced antiplatelet properties. Material and methods. Groups of control and experimental animals – nonlinear rats of both sexes – were formed to conduct research. The introduction of the tested PS (pharmaceutical substance) on a solution of distilled water in a volume of 4 ml/kg was carried out intragastrically, daily for 6 months. The studied PS RU-891 was administered to rats in doses: 23 mg/kg – 1st experimental group; 460 mg/kg – 2nd experimental group. The control group of animals was intragastrically injected with distilled water at a dose of 4 ml/kg. During the experiment, weekly measurements of body weight were carried out, body weight was expressed in g, an increase in %. Behavioral activity was studied in the classic “open field” test at the end of the 1st, 6th and 7th months of the chronic experiment. The study of the state of the cardiovascular system was carried out by electrocardiography recorded in anesthetized animals. The assessment of the excretory function of the liver and the excretory function of the kidneys was carried out using stress tests with the dyes “bromosulfalein” and “phenolic red”. The effect of PS RU-891 on the hematological parameters of the peripheral blood of rats was assessed according to the following indicators: the total number of erythrocytes, platelets, hemoglobin levels, hematocrit, and the number of leukocytes. The classic Mas-Magro test was used to assess the effect on blood clotting. During morphological examination, a macro- and microscopic assessment of the state of organs was performed and the coefficients of organ masses were determined. Histological microscopic studies were performed on a LUMAN I2 microscope using an eyepiece 7 and a lens 40. To carry out statistical processing of the results, the Microsoft Excel and Statistica 6.0 application software package was used. Results. Preclinical studies were conducted in experiments on sexually mature autobred rats, males and females, to assess the toxicological properties of a new benzimidazole derivative, the compound RU-891, with 6-month intragastric administration at doses of 23 mg/kg (experimentally proven therapeutic dose) and 460 mg/kg (exceeding TD by 20 times). It was found that under the action of the substance RU-891 at a dose of 23 mg/kg, the general condition of the animals, body weight gain, hematological, biochemical, electrocardiographic parameters, as well as the functional state of the detoxification and excretion organs corresponded to the values of the control group. In studies on animals treated with the substance RU-891 at a dose of 460 mg/kg (20 TD), a gradual deterioration in the general condition was noted (an increase in body weight, most pronounced in male rats), activation of behavioral activity in females, but its suppression in males, changes dependent on the sex of animals in peripheral blood (increased erythrocyte levels and blood clotting time in male rats and no effect on these parameters in females), decreased excretory liver function, but activation of excretory kidney function, pathomorphological negative changes in the liver. In studies conducted one month after discontinuation of the administration of the compound RU-891 at a dose of 460 mg/kg, integral indicators (body weight gain, general condition, behavioral activity) in animals, as well as changes recorded from hematological, functional and structural pathomorphological disorders in the liver were practically leveled to control values, which probably may indicate the absence of pathological toxic effects of the studied substance RU-891 when administered orally to rats at a dose of 460 for 6 months. At the same time, taking into account the results of morphological and functional studies, it can be assumed that the RU-891 compound at a dose of 460 mg/kg has an effect on the liver as a “target organ”. However, this damaging effect of the studied compound on the detoxification function of the liver was reversible, since it was practically leveled to a state of control within a month after the cancellation of its administration to animals. Limitation. Sexually mature nonlinear rats of both sexes were used in the study, the number of individuals in the control and experimental groups was sufficient to obtain statistically significant results. Conclusion. PS RU-891 at a dose of 23 mg/kg with 6-month administration to rats is non-toxic and safe, since it does not cause irreversible changes in general condition, behavior, hematological parameters, biochemical parameters of blood and urine, and functional activity of the heart. With daily administration of PS RU-891 at a dose of 460 mg/kg, pathological effects on the liver and kidneys were revealed, which persisted during the withdrawal period.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.